组分 | 10 Preps | 20 Preps | 保存条件 |
---|---|---|---|
Library-Transfection | 1 mL | 1mL×2 | -20℃ |
Packaging Plasmid Mix | 200μL | 200μL×2 | -20℃ |
Control GFP Plasmid | 50μL | 50μL×2 | -20℃ |
1. 文库质检:进行CRISPR文库病毒包装之前,应对CRISPR 文库质粒进行NGS质检,确保CRISPR文库的均一性和覆盖度符合要求。
2. 质粒质量:请务必使用高纯度无内毒素转染级质粒,CRISPR文库质粒DNAA260/A280比值应在1.8左右。
3. 包装细胞:为增加慢病毒包装产率,推荐使用LentiX-293T细胞作为CRISPR文库慢病毒包装细胞。细胞复苏并至少传代两次后再进行转染,请使用15代前的细胞包装CRISPR文库病毒。
请将试剂盒置于-20℃条件下长期保存,使用前4℃解冻;使用时各组分需充分融解、震荡混匀和离心;使用后可保存于4℃,请勿反复冻融。
本试剂盒使用针对CRISPR文库慢病毒包装进行特殊优化的转染试剂Library-Trans- fection, 可将CRISPR文库质粒高效转染至LentiX-293T细胞,同时使用优化了包装质粒配比的Packaging Plasmid Mix, 极大地提高了CRISPR文库慢病毒的产量。本试剂盒的主要优势包括:(1)转染效率进一步提高,同时降低细胞毒性,更适用于CRISPR文库质粒的转染;(2)无需自行准备包装质粒,试剂盒提供经优化配比的包装质粒,简化实验条件,提高病毒包装效率。本试剂盒可显著提高CRISPR文库慢病毒的产量,同时减少病毒包装过程 对CRISPR文库覆盖度和均一性的不利影响。
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