组分 | PK202A(200 Preps) | PK202B(200 Preps) | 保存条件 |
---|---|---|---|
Nuclease-free H₂O | 5 mL | 5 mL | -20 ℃ |
PCR Master Mix(2×) | 5 mL | 5 mL | -20 ℃ |
Primer Mix #G1-G6(10μM) | 各80 μL×2 | — | -20 ℃ |
Primer Mix#G7-G12(10μM) | — | 各80 μL×2 | -20 ℃ |
Positive Control A(Plasmid) | 10 μL | 10 μL | -20 ℃ |
Positive Control B(Genomic DNA) | 100 μL | 100 μL | -20 ℃ |
1. 适用范围:本试剂盒适用于LentiGuide为载体骨架的文库sgRNA扩增,基于LentiGuide改造而来的骨架载体也可使 用,更多详情可咨询技术服务。
2. 对照设置:可设置Nudease-free H₂O和不表达sgRNA的基因组为阴性对照,1μLPositive ControlA或10μLPositive Control B为阳性对照。
3. Ilumina测序及分析:同一条Lane样本需使用不同引物,超过6个样本时,可搭配A 、B两个型号试剂盒。超过12个样本时,使用相同引物的样本需分不同Lane测序,研美生物可提供Ilumina测序及个性化分析服务,详情咨询销售和技术服务。
请将试剂盒置于-20C 条件下保存;使用前,各组分需充分融解、震荡混匀和离心。
本试剂盒的主要优势包括:(1)采用一步法快速构建sgRNA NGS测序文库,使用高保真、高效率反应体系对sgRNA区段进行扩增,同时将测序接头组装至sgRNA序列两端;(2)无需进行多轮PCR,有效避免PCR过度扩增和产物反复纯化等操作引入的偏差。本试剂盒可大幅简化sgRNA NGS测序文库的构建流程,降低NGS建库成本,同时减少实验误差和损耗,有效保证功能筛选结果的准确可靠。
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