组分 | 5 Preps | 10 Preps | 保存条件 |
---|---|---|---|
Stable Electrocompetent cells | 50 μL×5 | 50 μL×10 | -80℃ |
Recovery Medium | 15 mL | 30 mL | -80℃ |
Positive control plasmid | 1 μg | 1 μg | -80℃ |
文库质粒扩增要求: 覆盖乘数应该大于500x , 以10000 sgRNA文库为例 , 用于计算转化效率的平板上应不少于500个单克隆菌落。
请将试剂盒置于-80 ℃条件下保存 , Recovery Medium首次使用后置于4 ℃保存。
本试剂盒使用Stable Electrocompetent Cells高效电击转化感受态, 通过电脉冲作用在细菌膜上形成孔隙,使遗传物质可渗透进入细菌膜,进行文库质粒大量扩增。本试剂盒的主要优势包括:(1)可高效、可靠地进行CRISPR文质粒保存与扩增;(2)使用可抑制大片段重组的Stable菌株,显著降低细菌克隆过程中序列之间的重组反应;(3)使用液体培养法直接扩增转化后的感受态细胞,无需涂平板和刮平板等繁琐步骤。本试剂盒可大幅简化CRISPR文库质粒扩增流程,增加文库质粒产量,同时显著减少扩增过程对文库质粒均一性和覆盖度的不利影响。
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